这项时间运动研究旨在评估和比较两种不同的细胞样本制备方法的特点，即传统离心法和无离心机的层流洗涤™方法。评估了诸如手动操作、无人值守时间以及与仪器交互的复杂性等特征。

材料和方法

在两种类型的细胞样品制备方法中的任何一种上进行同等的单次洗涤步骤。

● 离心机-使用96孔微孔板进行三轮洗涤

● 层流洗涤HT2000系统-使用层流洗涤96孔板（LW96）进行九个循环洗涤

运行时间定义（研究从普遍存在的抗体染色后孵化步骤开始）。

● 离心机——从加入缓冲液到3轮洗涤后去除上清液

● HT2000——从将LW96孔板装到仪器上到9次洗涤后取回平板

● 总手动操作时间——操作者主动处理样品和/或与仪器进行互动的总操作时间

● 总无人值守时间——操作员不主动参与的总时间（即自动化时间）。

复杂性评分（1-5分，1=不复杂，5=复杂）被用来评估使用仪器所涉及的步骤。评分分配中涉及的因素包括错误和污染的风险、仪器的用户友好性和结果的完整性。

最后，记录了两种样品制备方法的必要维护、仪器设置和关闭所需的时间（如适用）。

结果和讨论

表1: 运行时间测量

表1表明，与HT2000（约5分钟）相比，离心机的总运行时间（约25分钟）明显更长。与层流洗涤法相比，操作人员在离心机上的手动操作时间也更多，无论是绝对时间（10分钟 VS 1分钟），还是总运行时间的百分比（40.2% VS 10.5%）。层析流洗涤法大大增加了无人值守时间，约占总运行时间的90%，而传统离心机约为60%。综上所述，这些结果强烈地表明，使用HT2000在很大程度上将细胞样品制备转变为一个自动化过程，几乎不需要操作者的活动。

表2：仪器复杂性评分¹

¹复杂度表。1=不复杂的任务，2=稍不复杂，3=中性，4=稍复杂，5=复杂。

 表2显示，离心机的使用比HT2000稍微复杂一些，仪器的复杂性得分分别为2.5和2。两种仪器的一个明显区别是清洗步骤（即最需要动手的步骤），离心机的得分很高，为5分，而HT2000的复杂度为2分。 离心后倾倒或弹拨以去除上清液是容易造成操作者之间差异和污染风险的动手步骤。这一步骤非常复杂，取决于操作者的经验和技术，而这一点因人而异。因此，细胞清洗步骤中的手工操作会导致数据的不一致。

另一方面，由于减少了人工操作，HT2000没有那么复杂。LW HT上的流体装置分配和吸出连续的缓冲液交换，从而使离心所需的倾倒或翻转步骤自动化。可以预期，数据质量得到改善，变异系数（CVs）降低。

表3：操作员和仪器的相互作用

²板平衡，每轮离心

层流洗涤法需要日常维护、系统设置和关闭。在使用HT2000之前和之后，需要分别进行灌注步骤，每个步骤需要5:22。这些步骤的时间不包括在总的运行时间内，因为它们只在一天的开始和结束时进行，很大程度上可以被认为是无人值守时间，类似于细胞清洗的执行。在离心机的仪器设置中，包括了每次运行前所需的孔板平衡步骤，这花了我们30秒。这些步骤可能需要更长或更短的时间，这取决于所需的平衡，而且在一天的时间里可能会增加。

限制因素

这是一项粗略的时间运动研究，没有经过训练的时间运动分析人员进行。所采取的时间是基于一个操作者的单一清洗方案，因此代表性有限。

结论

与传统的离心法相比，用自动层流洗涤法制备下游应用的细胞悬液可以明显地节省时间，减少人工步骤，从而使不同的操作者、不同的地点和不同的时间的细胞样品制备更加一致。然而，层流洗涤仪器需要日常维护和该方法特有的设置交互。研究人员在调整实验室的目标和需求以决定最适合的细胞样品制备方法时，应考虑本文所述的所有因素。